- 在线咨询
关注微信公众号
【背景介绍】
肾缺血再灌注是一种用于模拟肾脏在缺血状态下再恢复血流情况的实验模型,这在医学研究中对于理解肾脏损伤和修复机制非常重要。这种模型通常使用微型动脉夹来夹闭小鼠的双侧肾动脉来制备,可以观察到肾功能和肾脏病理变化。
【实验材料和方法】
01 实验材料:
C57小鼠(雄性,6-8周)
异氟烷(厂家:瑞沃德 货号:R510-22-10)
通用型小动物麻醉机(厂家:瑞沃德 型号:R580S)
02 造模方法:
1、适应性喂养7天,小动物麻醉机混合纯氧进行麻醉。
2、腹侧皮肤剪开,暴露肾脏,直视下清晰显露一侧肾蒂,游离出一侧肾动脉,观察老鼠呼吸状态,缺血期密切观察肾脏颜色,,观察肾脏颜色由鲜红色变为暗红色,结扎45min后松开线结,再灌注后,逐层缝合关腹。术后观察小鼠状态至小鼠苏醒,再灌注后24h取材肾脏组织。
03 评价指标:
肾脏缺血图片,血清生化检测,HE染色,Tunel(荧光)检测
【验证】
肾脏缺血图片
血清生化检测
HE染色
(左:正常组;右:模型组)
HE染色结果:与正常组相比,模型组组织结构异常,肾间质可见炎细胞浸润。大量肾小管上皮细胞肿胀破裂,胞核消失,严重部位,细胞片状坏死、脱落。部分肾小管扩张,管腔内大量脱落的上皮细胞碎片呈管型。
Tunel(荧光)检测
(左:正常组;右:模型组)
Tunel结果:DAPI以蓝光表示,Tunel(+)以绿光表示。与正常组相比,模型组大量肾小管上皮细胞有明显的细胞凋亡现象。