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【背景介绍】 裸鼠成瘤模型(Cell Derived Xenograft, CDX)是一种常用的肿瘤研究模型，它涉及将体外培养的肿瘤细胞直接注射到免疫缺陷小鼠(通常是裸鼠，即BALB/c-nu小鼠)体内，以此模拟人类肿瘤的生物学特性，包括肿瘤的形成、发展、转移等过程。该模型广泛应用于抗肿瘤药物的筛选和疗效评估，帮助研究者了解药物对肿瘤生长的抑制作用。   【实验材料和方法】 实验材料：BALB/c-nu小鼠(雄性，18-22g);Panc02细胞(5*10^6/200μL) 造模方法：1、适应性喂养7天，每只裸鼠皮下注射癌细胞200μL。2、3-5天后观察裸鼠皮下肿瘤生长情况，1周后每间隔两天观察记录裸鼠皮下肿瘤生长状况。3. 28天左右取材，HE染色。 评价指标：动物大体图及肿瘤拍照，肿瘤生长曲线，HE染色。   【验证】 动物大体图 肿瘤拍照 肿瘤生长曲线 HE染色   HE染色结果：肿瘤细胞较小，呈圆形、卵圆形或短梭形，胞质稀少，胞界不清，有少量肿瘤细胞核固缩，凋亡，坏死。

【背景介绍】        哮喘（Asthma）是一种慢性气道炎症性疾病，具有可变气流阻塞、气道高反应性(AHR)和气道炎症等特征。哮喘的主要临床症状是呼吸短促、气喘、咳嗽以及接触过敏原后粘液分泌增多。其发病是由遗传、表观遗传和环境因素之间的复杂相互作用引起的。不同的病理改变由气道上皮细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞亚群等多种参与免疫应答的细胞介导，其中Th2细胞被认为在高嗜酸性粒细胞型哮喘中占主导地位，伴随细胞因子IL-4、IL-5和IL-13水平升高。经典的哮喘模型是卵清蛋白（OVA）诱导的气道炎症模型，经多次腹腔注射OVA致敏，雾化吸入OVA后激发，建立急性哮喘模型。   【实验材料和方法】 1.实验材料： SD大鼠（雄性，6-8周） 超声雾化器（厂家：富林 货号：W001） 卵清蛋白（厂家：麦克林 货号：E6377） 氢氧化铝（厂家：沪试 国药编码：20001060） 2.造模方法： 适应性喂养7天，在第1天和第8天腹腔注射含10mg的卵清蛋白及200mg的氢氧化铝的生理盐水，在第15天开始用含1%卵清蛋白的生理盐水雾化吸入激发，每天1次，每次 30 min，共14天，雾化结束取材肺组织。 3.评价指标： 血清炎症因子及IgE检测，HE染色。   【验证】 血清炎症因子及IgE检测     HE染色     正常组                                                          模型组        HE染色结果：正常组肺组织肺泡结构正常，支气管上皮结构基本完整，无明显脱落。模型组肺组织肺泡壁明显增厚，肺泡腔缩小，间隔增宽，结构紊乱；支气管、血管周围，以及肺间质可见大量炎细胞浸润；支气管平滑肌及基底膜明显增厚，气道杯状细胞增生，气道黏膜不规则增生，部分支气管内有上皮细胞脱落。

【背景介绍】 慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种常见的呼吸系统疾病，它具有高发病率和死亡率，严重时可能导致肺功能进行性减退、呼吸衰竭和肺源性心脏病等问题。为了研究COPD的发病机制、寻找有效的治疗方法，建立动物模型是科研工作的有效工具。   【实验材料和方法】 *实验材料： C57小鼠(雄性，6-8周);香烟(厂家：红河) *造模方法： 1：适应性喂养7天，用熏烟的方法将小鼠置于自制吸烟染毒箱内，箱体的顶部有1.5X1.5cm的小孔，保持箱体内空气与箱外保持相通。 2：点燃红河牌香烟(焦油量11mg，烟气烟碱量1.0mg，烟气一氧化碳量13mg)，放入染毒箱内，关闭染毒箱，1小时后将老鼠取出，休息15min后，再次点燃香烟，将老鼠继续放置染毒箱1小时，每天熏烟1次，每次2小时，每周连续熏烟6天，造模20周后取材，做HE染色。 *评价指标： 肺泡灌洗液炎症因子检测，HE染色。   【验证】 肺泡灌洗液炎症因子检测 HE染色 HE染色结果：正常组小鼠肺组织肺泡壁结构连续，相对完整。模型组支气管壁及周围炎细胞浸润，上皮细胞脱落，呈绒毛状增生;肺间质和肺泡腔炎细胞浸润，个别视野大量出血，肺间质明显增生;肺泡正常结构破坏，部分肺泡断裂，相互融合形成较大的泡腔。

【背景介绍】 肺纤维化是一种慢性、进行性的肺部疾病，其特征是肺组织的异常修复导致肺泡结构的破坏和纤维化。为了研究肺纤维化的发病机制、病理过程以及药物的疗效，建立与人肺纤维化病理过程相似的动物模型尤为重要。   【实验材料和方法】 *实验材料： SD大鼠（雄性，180-220g）；博莱霉素（MCE，HY-17565A） *造模方法： 1. 适应性喂养7天，动物麻醉机混合纯氧进行麻醉。剃毛机剃除老鼠颈部毛发，碘伏消毒。 2. 剥离气管，经气管注入5mg /kg的博莱霉素溶液，注射完毕后立即将大鼠直立旋转30秒，尽量使药液向下流入肺内时能够均匀分布，然后将大鼠轻轻放回笼中，使大鼠平躺，自然清醒。正常饮食，造模后4~5周后取材,做HE染色和Masson染色。 *评价指标： 肺组织生化检测，Masson染色，HE染色。   【验证】 肺组织生化检测 Masson染色 Masson染色结果：与正常组相比，模型组肺组织大量胶原纤维增生，被染成蓝色；肺泡壁明显增厚，肺泡结构破坏严重，肺泡腔缩小变实；肺泡和间质纤维化，有胶原沉积。  HE染色  ​HE染色结果：与正常组相比，模型组肺组织结构紊乱，肺泡结构破坏，肺泡腔缩小或消失；肺泡间隔和肺泡腔可见大量炎细胞浸润；肺泡壁增厚，间隔增宽。

【背景介绍】        血管形成是肿瘤发生发展、浸润与转移的重要条件，其中肿瘤细胞自身分泌的生长因子可以诱导血管生成。恶性肿瘤通常伴有快速增长和密集的血管，抑制血管生成可以有效地阻止肿瘤组织的生长和扩散，体外血管生成实验能够模拟肿瘤的血管发生过程，并且适用于研究药物对此过程的影响。   【血管形成实验】 01 实验原理 内皮细胞保留了分裂和快速迁移的能力，可响应血管生成信号。 02 血管形成一般使用哪些细胞？ 多种类型的内皮细胞均可用于本实验，包括原代细胞和永生化细胞系。常用的有“人脐静脉内皮细胞（HUVEC）”，之所以不采用静脉血管内皮细胞与动脉血管内皮细胞是因为HUVEC具有干细胞的潜能，理论上可以传代50-60次。此外小鼠3B-11细胞、小鼠SVEC4-10细胞或原代内皮细胞也可用于血管形成实验。 03 实验操作步骤 a.实验准备与材料： 实验前一天将Matrigel置于冰盒中，放入冰箱过夜，4℃温度，使胶缓慢融化。同样提前将枪头、EP管、96孔板放入4℃度冰箱中预冷。 b.分装： 将冻融的Matrigel进行分装，并用预冷枪头混匀，以300ul/管分装到EP管中，整个过程始终是在冰盒中进行。 c.铺胶： 将96孔板放在冰盒上，以每孔50ul把基质胶加到96孔板内，避免产生气泡，加完稍微摇晃均匀放在4℃冰箱中静置20-30min，再放入37℃细胞培养箱中1h等待凝固。 d.收集： 当内皮细胞达到80%时汇合度后准备消化，收集细胞进行计数，并按照稀释调整细胞的密度（初次实验设置细胞密度建议：3~10*10^4细胞）。 e.观察： 96孔板加入100ul的细胞悬液，做好标记后放入37℃细胞培养箱常规培养。四小时后可见血管形成。在镜下观察并拍照，时间为14~18h。结果分析。       【常见问题及解答】 1.如何正确加入基质胶？ 手持移液枪垂直于96孔板内孔的正上方，将基质胶滴入孔底部，防止基质胶沾到孔壁上。若孔底部没有铺匀，可晃动孔板使其均匀铺于底部。 2.血管形成实验，应选用多大浓度的基质胶呢？ 最低浓度应不低于10mg/mL，基质胶的稀释比例是6mg/mL以上。成管效果最好的是6~8mg/mL。 3.血管形成实验应选哪种凝胶基质？ 内皮细胞的管形成率取决于形成基底膜样细胞外基质(ECM)表面的凝胶的类型和成分，细胞在该表面上接种。  

【背景介绍】 急性肺损伤(acutelunginjury，ALI)是由非心源性的各种严重肺内外致病因素如严重感染休克、创伤、DIC、误吸等原发疾病引起，临床主要表现为急性进行性加重的呼吸困难和难治性低氧血症，进一步发展可演变为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。肺是这一过程中最易受损的首位靶器官，制备稳定的动物模型对观察ALl 病理改变，探究潜在药物作用机制，防治并发症等具有重要意义。   【实验材料和方法】 *实验材料： 实验动物：Balb/c小鼠(雄性，8周) 外源因子：LPS(sigma，L2630) *造模方法： 1.以阿佛丁0.2ml/10g对小鼠腹腔麻醉后，将小鼠四肢固定于泡沫板上，剃除颈部毛发，碘伏消毒，颈部切开，暴露气管。 2.采用气管插管的方式向小鼠气管内滴注LPS(5mg /kg)，气管滴注后将小 鼠直立，防止脂多糖逆流。 3.造模至少24h后取各组小鼠肺组织，HE染色观察病理变化。 *评价指标： 1.肺干/湿比 2.组织切片：进行HE染色以观察病理变化。   【验证】 *肺干/湿比 *HE染色                     正常组                                                  模型组 HE染色结果：与正常组相比，模型组肺组织肺泡壁厚度增加，肺泡腔缩小，有炎性细胞浸润。