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1.背景介绍
肾纤维化是肾脏病理变化的重要特征,表现为肾小管、肾小球和间质的纤维化。这种病理状况通常与慢性肾病(CKD)相伴随,最终可能导致肾功能衰竭。研究表明,肾纤维化的发生与多种因素有关,包括缺血、损伤、炎症及代谢紊乱等。
肾纤维化动物模型是理解肾脏疾病的重要工具,有助于揭示疾病机制、开发新疗法和发现生物标志物。通过不断优化和创新这些模型,研究人员期望能为肾病患者提供更有效的治疗方案。
2.实验材料和方法
01 实验材料:
● C57小鼠(雄性,6周)
● 异氟烷(厂家:瑞沃德 货号:R510-22-10)
● 通用型小动物麻醉机(厂家:瑞沃德 型号:R580S)
02 造模方法:
1、适应性喂养7天,小动物麻醉机混合纯氧进行麻醉。用剃毛器剃除腹部毛发,碘伏消毒。
2、腹侧皮肤剪开,暴露肾脏,直视下清晰显露一侧肾蒂,游离出一侧肾动脉,观察老鼠呼吸状态,缺血期密切观察肾脏颜色,观察肾脏颜色由鲜红色变为暗红色,结扎45min后松开线结,再灌注后,逐层缝合关腹。术后观察小鼠状态至小鼠苏醒,4周后取材肾脏组织。
03 评价指标:
肾组织大体图, Masson染色,HE染色
3.验证
肾组织大体图
Masson染色
正常组 | 模型组 |
Masson染色结果:正常组无明显蓝色纤维化组织。模型组肾小管严重损伤,大量胶原纤维沉积,肾间质出现纤维化,间质区增宽。
HE染色
正常组 | 模型组 |
HE染色结果:正常组肾小球、肾小管结构基本完整。模型组肾组织损伤严重,肾小管坏死、变性、肿胀,部分萎缩;肾小管上皮细胞脱落,刷状缘消失;肾间质有炎细胞浸润,肾小动脉内膜明显增厚。