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1.背景介绍

肝缺血再灌注（I/R）损伤是在移植和重大肝脏手术中发生的，可能导致术后肝功能障碍。越来越多的传统中药被用于治疗肝缺血再灌注损伤。评估不同保护效果的目的是为了研究不同药物对肝脏的保护作用。

 

2.实验材料和方法

01 实验材料

• C57小鼠（雄性，20-25g）

• 异氟烷（厂家：瑞沃德 货号：R510-22-10）

• 通用型小动物麻醉机（厂家：瑞沃德 型号：R580S）

 

02 造模方法 

1、适应性喂养7天，小动物麻醉机混合纯氧进行麻醉。

2、在上腹正中打开腹腔，小心暴露肝脏，并游离肝门韧带，结扎肝左叶入肝血管阻断血流。0.5min后,与非阻断的右叶和中叶相比，肉眼可见血管阻断的肝叶明显变白，说明阻断成功。临时关闭覆盖腹腔，完成持续缺血1h后，重新打开腹腔，迅速取出结扎线，恢复缺血肝血流，0.5min后可见缺血区肝脏由白色逐渐恢复为鲜红色表明再灌注成功。逐层缝合关闭腹腔，把老鼠放回笼内，再灌注6h后取材。

 

03 评价指标

肝大体图片，血清生化检测，HE染色 ，Tunel（荧光）检测

 

3.验证

肝缺血再灌注图片

血清生化检测

HE染色

  

（左：正常组；右：模型组）

HE染色结果：正常组肝组织细胞形态正常。模型组肝脏损伤严重，汇管区中央静脉结构异常、变形；肝细胞可见不同程度的肿胀变性、坏死，细胞质空泡化、核固缩；肝窦间隙增宽、窦内充血，肝索断裂、溶解，大量炎细胞浸润。

Tunel（荧光）检测

  

（左：正常组；右：模型组）

Tunel结果：DAPI以蓝光表示，Tunel(+)以绿光表示。与正常组相比，模型组肝脏出现大量的凋亡细胞，分布广泛，细胞核明显皱缩、碎裂，细胞间隙增大，肝组织损伤严重。