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1.背景介绍
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)可导致机体运动功能和感觉功能丧失,甚至造成死亡,对患者造成极大危害。脊髓损伤模型可以通过多种方法建立,包括挫伤、挤压伤、牵拉与脱位、横断、缺血、光化学、兴奋性毒性和电解伤模型。建立稳定的大鼠脊髓损伤模型是为了提供标准的疾病模型,以评估新治疗措施的有效性。
2.实验材料和方法
01 实验材料
SD大鼠(雄性,180-220g)
异氟烷(厂家:瑞沃德 型号:R510-22-10)
动物呼吸机(厂家:上海奥尔科特生物 型号:ALC-V8S)
通用型小动物麻醉机(厂家:瑞沃德 型号:R580S)
02 造模方法
1、适应性喂养7天,麻醉大鼠。
2、在背部脊髓两侧触摸大鼠最下肋与软组织分界处作为骨定位标志,术区消毒,选择 T10 为中心,作一2.5cm正中切口,充分暴露 T9至 T11节段,利用咬骨钳将T10棘突和椎板去除,注意硬膜完整。用打击器击打T10,若损伤后局部迅速充血水肿,且双后肢抽搐,尾巴摆动,则为造模成功。
3、术后4周取材脊髓组织。
03 评价指标
尼氏染色,HE染色
3.验证
尼氏染色
(左:正常组;右:模型组)
尼氏染色结果:正常组脊髓神经元尼氏体清晰可见,核大而圆,细胞质内有明显的斑块状尼氏体。模型组尼氏体数量减少,明显变浅,部分视野核固缩,尼氏体模糊不清,神经元间隙增大。
HE染色
(左:正常组;右:模型组)
HE染色结果:正常组脊髓结构基本完整,神经细胞分布均匀、形态正常,尼氏体清晰。模型组组织出血严重,有大片出血灶,组织中存在大量血细胞;灰白质结构破坏、撕裂,部分神经纤维溶解、消失;组织疏松水肿,空泡变性,尼氏体减少、浅染。