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【背景介绍】
脓毒症是指因感染引起的反应失调导致的危及生命的器官功能障碍,可累及多个脏器,导致脏器官功能损害或衰竭。脓毒症已成为常见的多发危重疾病,对人类健康构成了巨大威胁。动物疾病模型的建立有助于人们更好地探讨脓毒症的发病机制和寻找有效的治疗措施。
脓毒症造模的方法主要有3种,包括大肠杆菌感染型、脂多糖诱导型、盲肠结扎型。最广泛使用的脓毒症模型是盲肠结扎模型,该模型被认为与人类脓毒症具有显著相容性。盲肠结扎模型的主要优点是腹膜通过与失活组织结合而接种了来自动物本身的混合微生物菌群。在盲肠结扎后,会产生类似于人类败血症的免疫、血流动力学和生化反应。
【造模方法及验证】
1. 实验材料和方法
*实验材料:SD大鼠(雄性,6-8周)
*造模方法:
1. 以10%水合氯醛(300mg/kg)对大鼠腹腔麻醉后腹腔注射麻醉大鼠,麻醉满意后大鼠无翻正反射,以碘伏常规消毒腹部区域,铺无菌洞巾。
2. 沿腹正中线作一长约1cm纵行切口,用无菌镊探查并拖出暴露盲肠。
3. 在距盲肠盲端2cm处用无菌4号丝线结扎盲肠,用20G套管针将盲肠盲端贯通穿孔2次,避免损伤肠系膜及盲肠血管。
4. 挤出少许粪便后回纳腹腔,逐层缝合腹壁切口。
5. 造模至少24h后取各组大鼠肝、肾组织,HE染色观察病理变化。
*评价指标:动物行为学描述,HE染色。
2. 验证
*动物行为学描述
与正常组大鼠相比,模型组大鼠毛发脏、乱、无光泽,嘴和眼角会出现脓性分泌物,厌食、反应迟钝,体温低等现象。
*HE染色(肝)
*HE染色结果:与假手术组相比,模型组肝组织结构异常,有典型的脂肪变性空泡。
*HE染色(肾)
*HE染色结果:与假手术组相比,模型组肾组织结构异常,肾小球皱缩,肾小管损伤,有炎症细胞浸润。